Молекулярно-цитогенетическое исследование

Современное направление клинической цитогенетики — молекулярно-цитогенетическое исследование. Свыше 20 лет цитогенетические методы, основанные на технике выявления продольной сегментации хромосом, были основными в пренатальной и постнатальной цитогенетике. Разработка молекулярно-цитогенетических методов открыла новые возможности для изучения хромосом человека на субмикроскопическом уровне.

Виды молекулярно-цитогенетических исследований

Последние достижения молекулярной генетики позволили внедрить новые способы диагностики хромосомных болезней посредством генно-инженерных методов, которые основаны на технологии получения рекомбинантных молекул ДНК и применения их в форме ДНК-проб в целях диагностики наследственных дефектов.

Широкое распространение в диагностике хромосомной патологии получили методы:

• FISH-технологии;
• ДНК-гибридизации in situ;
• Саузерн-блот-анализ;
• прямое (радиоактивное и нерадиоактивное) секвенирование.

Молекулярно-цитогенетические исследования позволяют выполнять гибридизацию интерфазных и метафазных хромосом с различными ДНК-зондами, которые помечены флюоресцентными соединениями. Цитогенетики, изучающие кариотипы метафазных или прометафазных клеток, стремятся определить связь между их изменениями и фенотипическими проявлениями болезни, а также определить вклад перестроек хромосом в подтверждение диагноза и прогноз течения заболевания.

Возможности молекулярно-цитогенетических исследований

Эти методы диагностики используются для определения больших перестроек генома, затрагивающих целые гены или несколько генов: делеции, дупликации, инсерции, транслокации. Эффективно выявить эти нарушения позволяет FISH-метод.

Для обнаружения точковых мутаций и небольших делеций применяются различные методы. Все они основаны на принципе полимеразной цепной реакции. Точковые мутации, находящиеся в сайтах рестрикции, могут выявляться только при наличии ДНК-зондов. Это клонированные последовательности геномной ДНК, которые изолированы из области локализации гена. ДНК-зонды помогают выявить полиморфные локусы, которые могут использоваться в качестве генетических маркеров определенных участков хромосом.

Окончательный генетический диагноз формулируется после определения нуклеотидной последовательности исследуемого фрагмента ДНК и сравнения его с нормой.

Современные молекулярно-цитогенетические исследования проводятся в медико-диагностическом центре «Геномед».